李哈维奥斯瓦尔德使用的卡尔卡诺M91/38手动步枪
肯尼迪遇刺案发生于1963年11月22日星期五下午12:30，美国第三十五任总统约翰菲茨杰拉德肯尼迪在夫人杰基肯尼迪和得克萨斯州州长约翰康纳利陪同下，乘坐敞蓬轿车驶过得克萨斯州达拉斯的迪利广场（DealeyPlaza）时，遭到枪击身亡。约翰肯尼迪是美国历史上第四位遇刺身亡的总统，也是第八位在任期内去世的总统。负责总统遇刺案调查工作的沃伦委员会在经过了长达10个月的调查之后，于1964年9月发表了一份官方报告，在此份报告中指出，刺杀肯尼迪的凶手是得克萨斯州教科书仓库大楼的雇员李哈维奥斯瓦尔德，正是他从教科书大楼六层上的窗口向乘坐敞篷车正从楼下经过的总统开枪将其刺杀的。一个后来成立的官方调查委员会众议院遇刺案特别委员会（theHouseSelectCommitteeonAssassinations，HSCA）从1976年到1979年再次对总统遇刺案进行了详细的调查取证，并得出结论认为，奥斯瓦尔德刺杀肯尼迪绝不是个人行为。迄今为止，肯尼迪遇刺案仍然存在着很多置疑，引起了人们的广泛猜测，并且产生了许多关于肯尼迪遇刺案的理论。
肯尼迪当天乘坐的是1961年产的林肯大陆豪华敞篷车（LincolnContinental），本来这辆轿车是安装有防弹罩的，但是，为了让达拉斯市民一睹第一夫人杰基肯尼迪的芳容，同时也为了表示总统对达拉斯市民的信任，肯尼迪没有让特工人员安装防弹罩。车队的行进路线已经过了周密检查，在车队前方开道的警车隶属于达拉斯警察局，装备有和总统坐车保持联系的通讯设备，乘坐这辆车的是总统的特工。肯尼迪和夫人杰基乘坐的林肯轿车位于这辆警车的后方。总统坐车有三排座位，可以搭乘7人。车上搭乘的有：位于前排左侧的汽车司机威廉克瑞尔（WilliamCarrere）和右侧的秘密特工罗伊克莱曼（RoyClementine）；第二排上乘坐的是州长约翰康纳利和位于他左侧的州长夫人娜莉康纳利(NellieConnally）；肯尼迪和夫人杰基坐在后排座位上，肯尼迪位于右侧。
12:00过后，车队以15~20公里的时速开到达拉斯市内，所到之处拥挤着欢迎的人群，沿途两旁的楼房也都打开了窗户，正在工作的人们透过窗口观看这一盛况。枪击发生在总统车队经过迪利广场右侧的辅路埃尔姆大街时。当时，车队的时速已经从约20公里减慢至15公里。12:30\30\时，正当肯尼迪总统向人群挥手微笑时，广场上响起了沉闷的第一枪，肯尼迪总统用手捂住了喉部他被击中了脖子。杰基跪在肯尼迪的身边，绝望地试图用手阻止鲜血从肯尼迪身上流出。紧接着又响起了第二枪，由于遭到第一枪枪击的总统此时头部正向前微倾，而致命的第二枪击中了总统的后脑勺，肯尼迪的头猛地向后倒去。子弹打飞了他的部分头盖骨，鲜血和脑浆混在一起喷涌而出，溅满了坐车的后备箱和随车人员的全身。与此同时，康纳利州长也遭到枪击，身负重伤。
在美国中部时间下午13:00（UTC时间：19:00），在他所有的心脏机能都停止并且在牧师做完最后的仪式后，总统被正式宣布死亡。
李哈维奥斯瓦尔德在刺杀了达拉斯警警官J.D.提皮特（J.D.Tippit）80分钟后被逮捕。他在稍后的晚间被控杀死了提皮特和肯尼迪。奥斯瓦尔德否认枪击了总统并声明他是一个“容易受骗的人”。奥斯瓦德再没有重新被审讯，因为在2天后他被警方拘留的时候，被杰克卢比（JackRuby）枪杀并当场死亡。在他死前说道：“我只是一只替罪羊。”后来，在一张被路人拍摄的照片中发现，一个外貌很像奥斯瓦尔德的人在肯尼迪遇刺前几秒的时候，是站在路边的人群中的，这似乎可以说明奥斯瓦尔德在当时并不是位于教科书大楼的6层上，但这张照片真伪难辨。
联邦调查局是第一个完成官方调查的权威机构。在1963年12月9日，刺杀案仅仅过去17天的时候，联邦调查局的报告就出版了，并被提交至沃伦委员会，当时联邦调查局仍然是对于委员会来说主要的调查机构。联邦调查局陈述只有3颗子弹在刺杀案中被发射；第一枚射中了肯尼迪总统，第二枚射中了康纳利州长，第三枚射中肯尼迪的头部，并且致死。联邦调查局陈述道：李哈维奥斯瓦尔德射出了全部3发子弹。这份陈述与官方调查委员会的结论有一些出入，在官方调查委员会的报告中说，一共有4发子弹在这次刺杀案中被射出。联邦调查局发现一个探员詹姆士霍斯蒂(JamesHosty)的姓名和电话出现在奥斯瓦尔德的联络簿上。联邦调查局随即提供了另一份用打印机打印出的联络簿，在这份联络簿中，他的名字被删除了。当他在沃伦委员会作证时，他不小心地提到了他曾经与奥斯瓦尔德有联系，这个消息在很久之后才被公之于众。
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